Nhất Đại Nữ Hoàng – Võ Tắc Thiên xoay quanh cuộc đời của Võ Mị Nương, một thiếu nữ xinh đẹp được Đường Thái Tôn cứu trong một lần du hành. Sau đó, nàng được tuyển vào cung và phong làm Tài Nhân. Một nhà tiên tri đã xem thiên văn và cho vua biết rằng người con gái họ Võ từ Lợi Châu sau ba đời sẽ chiếm ngôi vua.
Trước khi băng hà, Đường Thái Tôn đã di chiếu cho đưa Võ Mị Nương đến một tu viện hẻo lánh để làm ni cô. Tuy nhiên, hoàng tử Lý Trị đã đem lòng yêu nàng và tìm cách đưa nàng trở về cung. Khi lên ngôi, Lý Trị chứng tỏ là một vị vua nhu nhược, và Võ Chiêu Nghi dần dần thu hết quyền hành trong tay.
Sau khi Lý Trị qua đời, các con của ông đều bất tài, và Võ Tắc Thiên đã phế vua, tự phong là Hoàng đế, lập ra nhà Châu. Đây là lần đầu tiên và duy nhất trong lịch sử Trung Hoa một người phụ nữ trở thành Hoàng Đế.
Câu chuyện cũng hé lộ về mối liên hệ giữa gia tộc họ Tiết và sự suy vong, phục hưng của triều đình. Họ Tiết đã từng có công lớn trong việc mở mang bờ cõi, và cũng sẽ đóng vai trò quan trọng trong việc giúp con cháu họ Lý khôi phục giang sơn nhà Đường.